一、無菌環(huán)境營造
1. 建筑設計與裝修
墻面與地面:細胞房的墻面和地面應采用光滑、無縫隙且易于清潔消毒的材料。例如,墻面可選用環(huán)氧彩砂自流平材料,這種材料不僅具備良好的耐化學腐蝕性,還能有效防止灰塵和微生物附著。地面則可采用同質(zhì)透心 PVC 地板,其防滑性能好,且拼接處密封性強,減少了細菌滋生的空間。
天花板:天花板需平整光潔,建議采用鋁合金扣板吊頂,便于拆卸清潔,且能有效避免積塵。同時,吊頂應與墻面緊密連接,不留縫隙,防止微生物進入。
門窗:門應選用氣密門,關閉時能確保房間的密封性,減少空氣交換帶來的污染。窗戶可采用雙層中空玻璃,既能保證良好的隔熱效果,又能防止外部灰塵和微生物進入。窗戶與墻體的連接處需做好密封處理,可使用密封膠填充縫隙。
2. 空氣凈化系統(tǒng)
空氣過濾:細胞房需配備高效的空氣過濾系統(tǒng),通常采用初效、中效和高效過濾器三級過濾。初效過濾器可過濾掉粒徑大于 5μm 的灰塵顆粒,安裝在新風入口處,保護后續(xù)設備不受大顆粒污染物的損害。中效過濾器能進一步過濾粒徑 1 - 5μm 的顆粒,安裝在空調(diào)機組的中級過濾段。高效過濾器則能過濾掉粒徑 0.3μm 以上的塵埃粒子和細菌,過濾效率可達 99.97%以上,一般安裝在送風口處,確保送入細胞房的空氣達到無菌要求。
氣流組織:合理的氣流組織對于維持無菌環(huán)境至關重要。常見的氣流組織形式有垂直單向流和亂流。垂直單向流能使空氣以均勻的速度和方向流動,避免空氣產(chǎn)生渦流,有效減少微生物在空氣中的停留和擴散,適用于對無菌要求極高的操作區(qū)域,如細胞接種和培養(yǎng)區(qū)域。亂流則適用于輔助區(qū)域,通過多次空氣循環(huán),降低空氣中的微生物濃度。
空氣消毒:除了過濾,定期對空氣進行消毒也是維持無菌環(huán)境的重要措施??刹捎米贤饩€消毒燈,安裝在天花板或墻壁上,定期開啟照射,殺滅空氣中的微生物。此外,也可使用過氧化氫汽化消毒設備,通過釋放過氧化氫氣體,對空氣和物體表面進行全面消毒,消毒效果更徹底。
3. 人員與物品管理
人員進入:進入細胞房的人員必須嚴格遵守更衣制度。在進入前,應更換專用的工作服、鞋套,戴上帽子、口罩,確保全身覆蓋,避免將外界的微生物帶入細胞房。同時,進入前需在風淋室進行風淋,通過高速氣流吹去附著在衣物上的灰塵和微生物。
物品進入:所有進入細胞房的物品,包括實驗器材、試劑等,都必須經(jīng)過嚴格的消毒處理。玻璃器皿可采用干熱滅菌法,在 160 - 180℃的高溫下滅菌 2 - 3 小時。塑料制品則可采用環(huán)氧乙烷滅菌或伽馬射線滅菌。對于不耐熱的試劑,可采用過濾除菌的方法,通過 0.22μm 孔徑的濾膜過濾,去除其中的微生物。
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